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保證ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的幾大基礎(chǔ)
更新時(shí)間:2022-02-23   點(diǎn)擊次數(shù):956次

根據(jù)前面說(shuō)到的ELISA試劑盒質(zhì)量控制中我們知道,由ELISA的性質(zhì)和來(lái)源,分為可測(cè)誤差、隨機(jī)誤差、人為誤差。在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,只有遵循它應(yīng)有的規(guī)則才能更好的完成實(shí)驗(yàn),對(duì)此
上海酶聯(lián)生物特別為您分析了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的幾大基礎(chǔ):

1.要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。

2.實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。

3.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

4.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

5.要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。

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再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
在操作步驟中,還有這幾個(gè)必知項(xiàng)目:

1. 溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。

2. 將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。

3. 洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

4. 洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

5. ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

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